Semis orchidées

J'ai ouvert ce post car je vais me lancer dans la culture in-vitro d'ici quelques semaines, le temps de rassembler le matériels manquants et de trouver les réponses aux dernières questions.

Je vais donc commencer par la dernière question que je me suis posée.

Lors du semis des graines on utilise un milieu de base, il ne doit pas êtres enrichi par quoi que ce soit, même si c'est des graines de Paphio ?

Le premier milieu va-t-il être suffisant jusqu'au premier repiquage?

pour les paphio j'ai rajouté 20 ml d'eau de coco (en brique bio) pour 1 litre. mais je crois que paul a fait sans ça  

Petite mise à jour .

Voilà, j'ai coulé mes milieux ce soir. Dans l'ensemble tout s'est bien passé, sauf un petit déboire avec les sparadraps qui ont collé sur le papier d'aluminium  

J'ai une petite question pour les pros de l'in-vitro.

Quand vous stockez vos milieux au frigo (4C°) est ce que les moisissures vont se développer si il y en a ?  

Ne faut-il pas plutôt les laisser à température ambiante ?

moins vite! perso je les conserve tous à température ambiante et pas de problème :)

personnellement, je coule mes milieux au moment du semis ou repiquage, je les sors de la cocotte dans le champ stérile et je laisse prendre la gelée, puis je sème ou repique directement. de cette façon les flacons sont déjà stériles partout, ça fait une manip de moins   
Sinon pour la conservation, à température ambiante c'est bien. Ce qu'il faut faire attention, c'est que ça ne soit stocké trop longtemps et surtout, à température constante pour éviter la déshydratation de la gélose.

Ah ben voilà, je vais te donner mes graines Renaud :)

Merci  de vos précieux renseignements à tous.

Prochaine étape attendre 10 jours pour voir si il y a contamination .

En suite laisser les milieux sous la hotte 2 heures pour voir si mon filtre heppa est toujours bon .

Cela ne me dérange pas Bertrand, mais j'en suis qu'a mes débuts mais je ne garantis aucuns résultats .

super ça Renaud ! moi quand j'ai commncé j'avais peur, résultat, après 1 an, c'est plus compliqué que ça ! il faut juste être rigoureux !
et encore moi je suis en glove box !
mes flacons je les conservent à t°C ambiante et pas de soucis !

Je reviens vers vous pour quelques questions supplémentaires .

J'ai enfin fini les dernières modifications et remises en état de ma hotte, j'ai pris un peux de retard .


Mes milieux sont coulés depuis quelques semaines et je vais enfin savoir si ma hotte est toujours stériles.

Mon idées est de mettre quelques pots dans la hotte de les ouvrir, d'attendre 2 heures, en suite les refermées et laisser 10 jours pour voir si il y a contamination.

Mais j'ai un peux de mal avec la façon de procéder.

Mes pots sont restés à l'aire libre (fermer ) donc ils sont contaminès extérieurement.

Voilas donc mes interrogations:

Dois je les désinfectées avant et avec quoi ?

Je fais quoi avec les couvercles je les laisse dedans le temps de la manipe et dois je encore les désinfectées après les couvercles ?

Merci d'avance pour votre aide.

Quand je manipule, je me pulvérise avant les mains avec de l'alcool à 70% au début et chaque fois après avoir touché quelque chose de non stérile et tout ce que je fais "rentrer" dans l'espace stérile de la hotte a aussi doit à sa petite pulvérisation.
Ca peut paraitre contraignant mais ça devient vite une habitude!!

gg68 a écrit:Quand je manipule, je me pulvérise avant les mains avec de l'alcool à 70% au début et chaque fois après avoir touché quelque chose de non stérile et tout ce que je fais "rentrer" dans l'espace stérile de la hotte a aussi doit à sa petite pulvérisation.
Ca peut paraitre contraignant mais ça devient vite une habitude!!

Tu penses donc que un cout de pulvérisateur suffira donc , peut on utiliser autre chose pour désinfectée au lieu de l'acool je pense à l'hypochlorite et si oui à combien la dissolution.

Je viens de faire la manipe, j'ai désinfectè à l'alcool comme GG68 me l'a dit nous verrons bien dans 10 jours.

C'est pas trop de laisser les pots 2 heures sous la hot ?

J'avais un pot foutu donc j'ai touchè le gélose, c'est normale que cela soit aussi dur ?

pour le semis sous hotte, je ne pratique pas, donc je ne peux pas donner de conseils!

pour la gelose, si tu as respecté les proportions d'eau et d'agar pour le produit utilisé, elle doit avoir la consistance qu'il faut.
pour le semis il ne faut pas que ce soit trop mou de toute façon sinon tu galeres aprés pour recuperer les protocormes à repiquer   

marine02 a écrit:pour le semis sous hotte, je ne pratique pas, donc je ne peux pas donner de conseils!

pour la gelose, si tu as respecté les proportions d'eau et d'agar pour le produit utilisé, elle doit avoir la consistance qu'il faut.
pour le semis il ne faut pas que ce soit trop mou de toute façon sinon tu galeres aprés pour recuperer les protocormes à repiquer   

Ok merci Marine pour le renseignement.


Les autres si vous avez des conseils je suis preneur.

Pour le semis c'est vrai que c'est mieux si c'est un peu dur, mais pour le repiquage, si le milieu est trop dur (pas assez d'eau), tu galères pour y planter les plantules.

C'est peut être moi qui trouve cela trop dur, comme je n'ai jamais fait de repiquage ou semis avant je n'ai pas de repaire .
Nous verrons cela dans une dizaine jours .

Merci GG pour ton complément de renseignement.

Bien voila 12 jours que j'ai ouvert mes pots sous ma hotte et il me semble que mon filtre soit toujours stérile car pas de contaminations .

Dernière étape pratiquer le semis.


Je vous tiens au courant.